產品描述
細胞凋亡是指為維持有機體內環(huán)境穩(wěn)定,由基因控制的細胞自主的有序的死亡。正常情況下,任何細胞在形成過程中發(fā)生的異常都會通過凋亡消除。例如,體內的癌細胞增長為腫瘤的過程會受細胞凋亡的引導而被抑制。然而,在抑癌基因p53出現問題時,凋亡就不會誘導發(fā)生,從而導致癌細胞的不斷增長。
細胞凋亡可以通過細胞形態(tài)的變化或生物化學的變化來檢測。目前常用的指標有caspase活性變化、DNA碎片、磷脂酰絲氨酸的外翻等。
AnnexinV染色的細胞可以用于檢測細胞凋亡早期的細胞膜變化。在細胞凋亡早期,膜磷脂酰絲氨酸由脂膜內側翻向外側。
AnnexinV是一種Ca離子依賴性磷脂結合蛋白,可以與磷脂酰絲氨酸特異結合。用綠色熒光FITC標記的Annexin V通過流式細胞儀或熒光顯微鏡可以檢測到細胞凋亡的發(fā)生。碘化丙啶(Propidium Iodide, PI)是一種核酸染料,PI只能透過凋亡晚期和死細胞的細胞膜,因此Annexin V和PI結合使用,可以區(qū)分凋亡早晚期的細胞及死細胞。
所需的設備和材料
- 樣品和誘導劑
- PBS、去離子水
- 合適量程的移液器
- 細胞培養(yǎng)用6,12,24,96孔板
- 流式細胞儀或熒光顯微鏡。
* zui大激發(fā)/發(fā)射波長
Annexin V, FITC: 494 nm/518 nm;PI: 535 nm/617 nm
溶液制備
1×Annexin V Binding solution:
將10×Annexin V Binding Buffer用超純水稀釋10倍。
穩(wěn)定性
試劑盒在0-5℃下可以保存6個月,
請避光保存Annexin V, FITC結合物。
儲存條件
0-5℃,避光 (切勿凍存)
運輸條件 室溫