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SYBR Green II(10000×)

  • 型   號(hào):
  • 價(jià)   格:
  • 更新時(shí)間:2024-08-24
  • 廠(chǎng)家性質(zhì):經(jīng)銷(xiāo)商

SYBR Green II RNA染料是一種高敏感的核酸染色試劑,可以對(duì)RNA或者是單鏈的DNA進(jìn)行染色。

 

SYBR Green II(10000×)

R0928 SYBR Green II(10000×) NobleRyder 100ul 520.00

SYBR Green II RNA染料是一種高敏感的核酸染色試劑,可以對(duì)RNA或者是單鏈的DNA進(jìn)行染色。使用300nm透射光顯影的情況下,非變性凝膠中檢測(cè)核酸的靈敏度可以達(dá)到5×10-7克。與傳統(tǒng)的EB染料相比SYBR Green II RNA染料的靈敏度更高,可以應(yīng)用于雜交前RNA質(zhì)量的檢測(cè),同時(shí)不會(huì)影響后續(xù)的轉(zhuǎn)膜,還可應(yīng)用于變形梯度凝膠電泳(DGGE)和單鏈構(gòu)象多態(tài)性分析(SSCP)等實(shí)驗(yàn)。SYBR Green II RNA染料可以代替銀染和EB染色,消除了銀染復(fù)雜、費(fèi)時(shí)的缺點(diǎn);與EB染色相比,形成的SRBR Green II -RNA復(fù)合物所激發(fā)的熒光是EB-RNA復(fù)合物激發(fā)熒光的7倍。SYBR Green II RNA染料并不是特異性的結(jié)合RNA或者DNA單鏈,但是其對(duì)單鏈的結(jié)合效率是雙鏈的約2倍,廣泛的應(yīng)用于RNA的質(zhì)量分析中。

染色方法:

SYBR Green II RNA 染料檢測(cè)核酸時(shí)即可預(yù)染也可以電泳后再進(jìn)行染色。做預(yù)染使用時(shí),取1ul貯存液加入1ml TE緩沖液或者滅菌雙蒸水中混勻,再加入1ml 6-loading buffer上樣緩沖液混勻(此時(shí)溶液為12000稀釋?zhuān)礊楣ぷ饕海╇娪緯r(shí)取1-2ul工作液和5ul電泳樣品混勻后直接上樣。注意:須將商品化的核酸MARKER作一定倍數(shù)的稀釋?zhuān)?/span>1/5-1/10),這樣才能得到比較理想的結(jié)果。

電泳后染色。電泳后,在室溫、避光的情況之下準(zhǔn)備染色液。染色液要在塑料器皿中制備而不要在玻璃器皿中,因?yàn)椴AП韺訉?duì)該試劑有吸附作用。

染料取出后室溫放置,恢復(fù)室溫后簡(jiǎn)單離心混勻。

染色液使用1×TBE緩沖液進(jìn)行110000稀釋。如果是瓊脂糖甲醛變性膠,用1×TBE15,000的稀釋。由于SYBR Green II RNA染色液靈敏度高,所以要選用新鮮的1×TBE緩沖液進(jìn)行稀釋?zhuān)悦饩彌_液中殘存的雜質(zhì)產(chǎn)生背景,影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。注意:為了提高染色的靈敏度,要確定緩沖液的PH值在7.58之間,因?yàn)?/span>SYBR Green II RNA染色液對(duì)PH敏感。

把膠放在塑料的染色容器中,加入足夠染色液使之覆蓋整塊膠。用鋁箔遮蓋或者是放在暗處避光。在染色之前沒(méi)有必要先將膠中的變性劑如尿素和甲醛洗出來(lái),因?yàn)?/span>SYBR Green II RNA染色液復(fù)合物發(fā)出的熒光在甲醛或者尿素存在時(shí)不會(huì)猝滅。

在室溫下輕輕搖晃凝膠。聚丙烯酰胺凝膠的*染色時(shí)間是10-40分鐘,瓊脂糖凝膠的*染色時(shí)間是20-40分鐘。染色時(shí)間也可能隨著凝膠的厚度和濃度變化。由于其熒光本底很低,凝膠染色后無(wú)需脫色。染色工作放在2-8°C避光保存,可以重復(fù)使用3-4次。注意:SYBR Green II RNA染色液不影響RNA向膜上的轉(zhuǎn)移和northern中的后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

染色膠顯色和成像:SYBR Green II RNA染色液復(fù)合物所激發(fā)的熒光可以使用300nm254nm光波照射,通過(guò)Wratten 15 濾光片檢測(cè)。注意:由于熒光本底較低,所以可以通過(guò)適當(dāng)延長(zhǎng)曝光時(shí)間的方法檢測(cè)痕量的核酸。

請(qǐng)帶手套操作。

貯存

SYBR Green II RNA染色液保存于DMSO溶液中,此貯存液于保存溫度為-20°C,放置于避光干燥器中,在以上條件下,可在保存一年。稀釋工作液在2-8°C可以放置一周,在室溫放置3-4天。

 

貨號(hào)

產(chǎn)品名稱(chēng)

品牌

規(guī)格

價(jià)格(元)

D0963

2×Pfu PCR MasterMix (不含染料)

NobleRyder

1ml/10ml

160.00/1200.00

D0962

2×Pfu PCR MasterMix (含染料)

NobleRyder

1ml/10ml

160.00/1200.00

D0961

2×Taq PCR MasterMix (不含染料)

NobleRyder

1ml/10ml

80.00/580.00

D0960

2×Taq PCR MasterMix(含染料)

NobleRyder

1ml/10ml

80.00/580.00

D0965

2×Taq Plus PCR MasterMix (不含染料)

NobleRyder

1ml/10ml

120.00/1000.00

D0964

2×Taq Plus PCR MasterMix (含染料)

NobleRyder

1ml/10ml

120.00/1000.00

D0110

DNA退火緩沖液

NobleRyder

5ml

80.00

D0973

dNTP(10mM)

NobleRyder

1ml

80.00

D0974

dNTP(2.5mM)

NobleRyder

1ml

40.00

D0951

Pfu DNA Polymerase

NobleRyder

500U/2500U

180.00/720.00

D0033

SYBR Green I(20×)定量PCR用

NobleRyder

1ml

120.00

R0928

SYBR Green II(10000×)

NobleRyder

100ul

520.00

D0950

Taq DNA Polymerase

NobleRyder

1000U/5000U

80.00/320.00

D0952

Taq Plus DNA Polymerase

NobleRyder

500U/2500U

140.00/560.00

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