NobleRyder cDNA合成
NobleRyder cDNA合成 NobleRyder RET04-50 cDNA合成 NobleRyder RET04-100 cDNA合成
NobleRyder RET04-50 cDNA合成 NobleRyder® First Strand cDNA Synthesis SuperMix for qPCR(with dsDNase) 50rxns
產(chǎn)品品牌：NobleRyder
產(chǎn)品貨號：RET04-50
產(chǎn)品名稱：cDNA合成
英文名稱：NobleRyder® First Strand cDNA Synthesis SuperMix for qPCR(with dsDNase)
產(chǎn)品規(guī)格：50rxns
產(chǎn)品內(nèi)容：
組分 | CA04-50 | CA04-100 |
4× Master SuperMix 5×gDNA Eraser Mix RNase-free Water | 250 μL 100 μL 1 mL | 500 μL 2×100 μL 2×1 mL |
產(chǎn)品簡介:
NobleRyder® First Strand cDNA Synthesis SuperMix for qPCR（with dsDNase）是一款含有基因組去除組分的第一鏈cDNA合成試劑盒，可高效去除RNA中的基因組DNA污染。4× Master SuperMix 中包含第一鏈cDNA合成所需的所有組分，使用時僅需加入RNA模板和水即可進(jìn)行合成，使用本試劑盒獲得的cDNA可用于qPCR、普通PCR等實(shí)驗(yàn)。
NobleRyder cDNA合成
注意事項(xiàng):
1. 請于使用前確保產(chǎn)品wan全解凍，徹di混勻后短暫離心，置于冰上備用。
2. 為避免樣品間交叉污染和氣溶膠污染，推薦在超凈臺或生物安全柜中進(jìn)行反應(yīng)體系的配制,并使用帶濾芯的吸頭。
3. 反復(fù)凍融會影響產(chǎn)品的性能。
4. 為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
實(shí)驗(yàn)流程:
基因組DNA去除
試劑 | 體積 |
5× gDNA Eraser Mix | 2 μL |
Total RNA | ＜1 μg |
RNase-free Water | up to 10 μL |
用移液器輕輕吹打混勻，37℃反應(yīng)2min，立即置于冰上，或者繼續(xù)55℃反應(yīng)5min后置于冰上。（55℃反應(yīng)5min能充分失活dsDNase，后續(xù)加入的4× Master SuperMix中含有DTT也能抑制dsDNase的活性）
配置第一鏈cDNA合成反應(yīng)體系
1. 試劑配置
試劑 | 體積 |
4× Master SuperMix | 5 μL |
Total RNA | Up to 1 μg |
RNase-free Water | Up to 20 μL |
2 輕柔吸打混勻。
3反應(yīng)程序設(shè)置
溫度 | 時間 |
25℃ 50℃* 85℃ | 5 min 15~45 min 5 min |
*如果模板具有復(fù)雜二級結(jié)構(gòu)或高GC區(qū)域，可將反應(yīng)溫度提高到55℃，有助于提高產(chǎn)量。
4 該產(chǎn)物可直接用于第二鏈的合成或qPCR擴(kuò)增反應(yīng)，請?jiān)?span>-20℃保存產(chǎn)物。
產(chǎn)品訂購信息：
NobleRyder RET04-50 cDNA合成 NobleRyder® First Strand cDNA Synthesis SuperMix for qPCR(with dsDNase) 50rxns
NobleRyder RET04-100 cDNA合成 NobleRyder® First Strand cDNA Synthesis SuperMix for qPCR(with dsDNase) 100rxns
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